胰腺癌是一种恶性程度很高，诊断和治疗都很困难的消化道恶性肿瘤，约90%为起源于腺管上皮的导管腺癌。其发病率和死亡率近年来明显上升。5年生存率<1%，是预后差的恶性肿瘤之一。胰腺癌早期的确诊率不高，手术死亡率较高，而治愈率很低。目前对胰腺癌的大多数研究只限于可切除的患者，但是胰腺癌的早期诊断困难，且手术切除率低，在诊断时只有10％至15％的胰腺癌患者可切除，使得从患者身上获得肿瘤样本的难度较大。 因此，胰腺癌患者迫切地需要找到可靠的预后生物标志物。ctDNA是近年来发现的一种具备广泛应用前景、高敏感性、高特异性的肿瘤标志物，同时因为它只要抽血（而不必开刀），取样方便，可以应用于肿瘤病人的病情随访，并可以多次取样，且适用于多种肿瘤。那么，在胰腺癌诊断和治疗中，ctDNA的是否具有监测或预后作用呢？

       近日，发表在Clinical Cancer Research的一篇研究通过收集135例胰腺癌患者的血液样本，其中有31例是可切除胰腺癌患者，36例患有晚期局部疾病，68例转移性胰腺癌患者，利用二代测序和dPCR的方法，来鉴别基于血液的生物标志物。

       文章得到的结果如下：

       1通过DNA测序分析查找突变和dPCR筛选突变，在104例晚期胰腺癌患者中，有50例患者的血液样本中可检测到ctDNA。其中，43（86％）有KRAS突变，27（54％）检测到至少两个突变。

图1  可检测到ctDNA的晚期患者中突变基因的分布情况

       2检测到ctDNA 的50例患者样本中，有65％为未分化肿瘤患者，58％为中等分化，仅有30％在高分化肿瘤，说明ctDNA检测与肿瘤分化程度密切相关。在没有检测到ctDNA的患者中，总生存期（OS）为19个月，而在检测到ctDNA的患者中则为6.5个月。揭示血液中ctDNA可作为胰腺癌患者的预后生物标志物（图2A）。此外，为了评估ctDNA水平的影响，根据MAF三分位数将患者分组后总生存期OS分别为18.9、7.8和4.9个月（P<0.001），结果表明总生存期与血液中ctDNA有显著的剂量关系（图2B）。

图2  根据ctDNA可检测性绘制的存活曲线

       3在31名不可切除胰腺癌患者中，有6名在手术后检测到了ctDNA。研究者根据ctDNA可检测性绘制了31名患者的存活曲线（图3），发现血液中的ctDNA会大大缩短患者的无进展生存期（PFS）以及总体生存期（OS）。

图3  根据ctDNA可检测性绘制的存活曲线  A 无进展生存期（PFS）   B 总体生存期（OS）

总结：研究通过NGS和微滴式数字PCR筛选到KRAS，证实了通过NGS分析方法检测胰腺癌患者的ctDNA的可行性，并研究证实KRAS与胰腺癌有强烈的相关性，还揭示了晚期胰腺腺癌中检测ctDNA的预后价值。

参考文献：Pietrasz D, Pécuchet N, Garlan F, et al. Plasma Circulating Tumor DNA in Pancreatic Cancer Patients Is a Prognostic Marker[J]. Clinical Cancer Research, 2016, 23(1):116.